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  • ペプチド抗体作製 N末端アミノ酸配列解析:ポリクローナル抗体作製サービス

ポリクローナル抗体作製サービス 

ニーズにあわせて選択できる、便利で割安なキットを各種用意しております。

現在価格改定中につき、 価格については、恐れ入りますが、tech@jbios.co.jpにお問い合わせください。

抗ペプチド ウサギ抗体キット 

もっとも一般的なポリクローナル抗体が手軽にご注文いただけます。

免疫動物 
抗原
キット名
免疫日数
免疫回数
抗原
ペプチド数
キット価格
ウサギ 2羽
ペプチド
ウサギA
ペプチド1抗原キット
53日
3回免疫 
1
ウサギA
ペプチド2抗原キット
2
ウサギA
ペプチド3抗原キット
3
ウサギB ペプチド1抗原キット 
88日
4回免疫
1
ウサギB ペプチド2抗原キット 
2
ウサギB ペプチド3抗原キット
3

※抗体獲得の可能性を高めるために、複数の抗原ペプチドの使用をお勧めします。

これらのキットには以下のサービスが含まれています。

(1) 抗原ペプチド設計に関する支援サービス   

目的とするタンパク質の配列情報をもとに、下記 a)~e)の検討を行い、抗原ペプチドの配列を提案いたします。

a)抗原性、疎水性及び反応性 
b)ペプチドの特異性を確認するためのブラストサーチ 
c)二次構造分析(シグナルペプチド、膜貫通ドメイン、DNA結合ドメイン及びその他の分析) 
d)特異的抗原性ペプチドを特定するための配列解析 
e)合成の難易度を予測して配列決定するための事前分析 

(2) ぺプチド合成

15残基まで (純度70%以上)、約20mg 
 
※15残基を超える場合、4,300円/残基(追加料金)となります。 
※ペプチド TOF-MASS 分析データ 添付、未使用ペプチドは、抗体と同時に発送します。 
※ペプチドの保存については、ペプチド取り扱い及び保存に関する注意事項 をご覧ください。

(3)キャリアコンジュゲーション

通常はKLHですが、必要に応じてBSA、Ovalbumin等のキャリアに変更可能です(無償)。

(4)ウサギ2羽への免疫

Aキット:3回,  Bキット:4回 
 
※ウサギは NewZealand white rabbit を使います。 
※5羽のウサギについて 免疫前テスト採血を行い、選別していただく、ウサギ 免疫前スクリーニングサービス 
(有償 20,000円)もご利用いただけます。(免疫前血清 5羽分、各 1 mL を提供します。)

(5) テスト採血

・Aキット:免疫前採血5mL、39日目採血12~15mL、各々ELISA実施 
・Bキット:免疫前採血5mL、53日目及び74日目採血5mL、各々ELISA実施 
 
※テスト採血をお手元で確認されるとき、通常ウエスタンブロットが使われます。 
ウエスタンブロットで起きるトラブルについては、ウェスタンブロットでおきがちな問題と対策をご覧ください。

(6) 最終全採血

テスト採血の結果をご確認いただき、最終採血のご指示をいただいて、全採血に移ります。 
 標準日程では  
Aキット: 53日目、 
Bキット: 88日目 
となります。

(7) 抗体精製 及び 活性の把握 

最終採血品5mLに対して、ペプチド固相カラムによるアフィニティー精製を行います。 
精製の際、いずれか一方のウサギの血液(または2羽の血液をプールしたもの)を使用しますので、ご要望があればご指示ください。 
また、複数の抗原ペプチドをご使用の場合、精製に使用するペプチドは「活性の高い一方」または「複数」を指定することができますので、ご指示ください。 
複数抗原キットに含まれているアフィニティー精製カラムは1種類です。
従って、抗原毎の精製が必要な場合、1カラム毎に28,000円の追加負担となります。 
最終採血品及びアフィニティー精製品についてELISAを実施します。

(8) 最終精製品の納品時に、アフィニティー精製カラム 及び 精製プロトコールをお届けいたします。 

精製プロトコールを参照ください。 
※抗体の保存、取り扱いについては、抗体の保存と安定性についてをご覧ください。

Aキットは、目的抗体をできる限り早く得るための、最短の免疫のスケジュール設定となっております。

Aキットで免疫スケジュールを開始し、テスト採血段階で十分な活性が得られていないと判断された場合、Bキットへの移行が可能です。 
つまり活性の上昇が不十分と判断されたときは 免疫期間を延長し、追加免疫に移ることが可能です。

 追加免疫 追加負担 20,000円(税別)  
・ペプチド追加免疫:ウサギ各1回、免疫期間の延長:通常2週間 
 ELISA テストを含む追加免疫 追加負担 30,000円(税別)
・ペプチド追加免疫:ウサギ各1回、免疫期間の延長:通常2週間、テスト採血、ELISAテスト 

抗リン酸化ペプチド抗体キット

免疫動物
ウサギ2羽
抗原
リン酸化ペプチド
キット名 
抗リン酸化ペプチド抗体ウサギBキット 
免疫日数
88日
免疫回数
1(リン酸化ペプチド) 
但し、非リン酸化ペプチドを精製・ELISA目的で使用 
キット価格

リン酸化特異的抗体を獲得するため、リン酸化ペプチドを用いて免疫します。  
※その他のサービス内容は、上記(抗ペプチド ウサギBキット)と同じです。 

抗タンパク ウサギ抗体キット

免疫動物 
抗原
キット名
免疫日数
免疫回数
キット価格
ウサギ 2羽
ご提供いただくタンパク質
抗タンパク
ウサギAキット
53日
3回免疫 
抗タンパク
ウサギBキット
88日
4回免疫
★ 

※★についてはtech@jbios.co.jpまでお問い合わせください

※ご提供いただく抗原:タンパク質 (500 μg 以上) 
※免疫回数や量を増やすことにより、危険が伴う可能性があります。免疫する抗原の毒性に伴う事故については、免責とさせていただきます。 
※タンパク質以外の各種ハプテンについても 抗体作製の経験があります。ご相談ください。

このキットには以下のサービスが含まれています。

(1) 抗原ペプチド設計に関する支援サービス 

目的とするタンパク質の配列情報をもとに、下記 a)~e)の検討を行い、抗原ペプチドの配列を提案いたします。 
a) 抗原性、疎水性及び反応性 
b) ペプチドの特異性を確認するためのブラストサーチ 
c) 二次構造分析 (シグナルペプチド、膜貫通ドメイン、DNA結合ドメイン及びその他の分析) 
d) 特異的抗原性ペプチドを特定するための配列解析 
e) 合成の難易度を予測して配列決定するための事前分析

(2) ぺプチド合成

15残基まで (純度70%以上)、約20mg 
 
※15残基を超える場合、4,300円/残基(追加料金)となります。 
※ペプチド TOF-MASS 分析データ 添付、未使用ペプチドは、抗体と同時に発送します。 
※ペプチドの保存については、ペプチド 取り扱い及び保存に関する注意事項 をご覧ください。

(3) キャリアコンジュゲーション

通常はKLHですが、必要に応じてBSA、Ovalbumin等のキャリアに変更可能です。(無償)

(4)ウサギ2羽への免疫

Aキット:3回
Bキット:4回
※ウサギは NewZealandwhiterabbitを使います。 
※5羽のウサギについて免疫前テスト採血を行い、選別していただく、ウサギ免疫前スクリーニングサービス(有償 20,000円)もご利用いただけます。(免疫前血清5羽分、各1mLを提供します。)

(5) テスト採血

・Aキット:免疫前採血5mL、39日目採血12~15mL、各々ELISA実施 
・Bキット:免疫前採血5mL、53日目及び74日目採血5mL、各々ELISA実施
 
※テスト採血をお手元で確認されるとき、通常ウエスタンブロットが使われます。ウエスタンブロットで起きるトラブルについては、テクニカルサポートページのウェスタンブロットでおきがちな問題と対策をご覧ください。 

(6) 最終全採血

テスト採血の結果をご確認いただき、最終採血のご指示をいただいて、全採血に移ります。 
標準日程では、Aキット:53日目 / Bキット:88日目 となります。

(7) 抗体精製 及び 活性の把握

最終採血品 5mL に対して、ペプチド固相カラムによる アフィニティー精製を行います。 
精製の際、いずれか一方のウサギの血液(または 2羽の血液をプールしたもの)を使用しますので、ご要望があればご指示ください。 
また、複数の抗原ペプチドをご使用の場合、精製に使用するペプチドは「活性の高い一方」または「複数」を指定することができますので、ご指示ください。 
複数抗原キットに含まれている アフィニティー精製カラムは1種類です。 
従って、抗原毎の精製が必要な場合、1カラム毎に28,000円の追加負担となります。 
最終採血品 及び アフィニティー精製品について ELISA を実施します。

(8) 最終精製品の納品時にアフィニティー精製カラム 及び 精製プロトコールをお届けいたします。 

Aキットは、目的抗体をできる限り早く得るための、最短の免疫のスケジュール設定となっております。

抗体産生の観点から、Bキットのスケジュールの方がより免疫活性の高い抗体が得られる可能性があります。
Aキットで免疫スケジュールを開始し、テスト採血段階で十分な活性が得られていないと判断された場合、Bキットへの移行が可能です。 
つまり、活性の上昇が不十分と判断されたときは、免疫期間を延長し、追加免疫に移ることが可能です。

 追加免疫 追加負担:20,000円(税別)  
・ペプチド追加免疫:ウサギ各1回、免疫期間の延長:通常2週間 
 ELISA テストを含む追加免疫 追加負担:30,000円(税別)
・ペプチド追加免疫:ウサギ各1回、免疫期間の延長:通常2週間、テスト採血、ELISAテスト 

抗ペプチド ニワトリポリクローナル抗体

ニワトリ抗体のIgYは、哺乳動物のIgGに相当し、IgYのFcフラグメントはIgGと異なるので、哺乳動物タンパクとはクロスしない利点があります。 
また、卵黄でもIgYが集積し、抗体が多量に得られる利点もあります。 
但し、抗ペプチド抗体では、免疫活性の上昇はウサギと比較し、低いことが多いようです。 
抗タンパクニワトリ抗体では比較的活性上昇が良好です。

免疫動物 
抗原
キット名
免疫日数
免疫回数
抗原
ペプチド数
キット価格
ニワトリ2羽
ペプチド
ニワトリ 
IgY 精製なし 
1抗原キット
90日
4回免疫 
1
ニワトリ 
IgY 精製なし 
2抗原キット
2
ニワトリ 
IgY 精製なし 
3抗原キット
3
ニワトリ 
IgY 精製付き 
1抗原キット 
1
ニワトリ 
IgY 精製付き 
2抗原キット 
2
ニワトリ 
IgY 精製付き 
3抗原キット 
3

※★についてはtech@jbios.co.jpまでお問い合わせください

※本キットのテスト採血量および最終採血量は、以下の通りです(抗ペプチドウサギBキットとは異なります)。

テスト採血量各 1~2 mL
各 1~2 mL15~20 mL 

抗タンパク ニワトリポリクローナル抗体

免疫動物 
抗原
キット名
免疫日数
免疫回数
卵黄 
IgY 精製
キット価格
ニワトリ2羽
ご提供いただく
タンパク質 
抗タンパク 
ニワトリ IgY 
精製なし キット
90日
4回免疫 
IgY 精製なし 
抗タンパク
ニワトリ IgY 
精製付き キット
IgY 精製あり

※★についてはtech@jbios.co.jpまでお問い合わせください

このキットには以下のサービスが含まれています。

(1) 提供された タンパク質 の調製 必要量:250 μg / 羽
(2) ニワトリ2羽への免疫4回
(3) テスト採血免疫前採血 2mL、 55日目 及び 76日目採血 2 mL
(4) 最終全採血(4) 最終全採血
(5) IgY 精製
 ( IgY 精製付きキットのみ)
卵黄から IgY 精製 を行います。

保証について
弊社が提案させていただいた抗原ペプチドを採用した場合、途中採血、最終採血のすべてにおいて、希釈倍率1/2000(ニワトリの場合は1/800)におけるELISAのOD値が1未満である場合、見積金額の30%を値引きさせていただきます。

最終免疫以前の動物死亡の場合は、弊社の責任において別個体への免疫をさせていただきます。
別個体への免疫を不要とされるときは、見積金額の30%を値引きさせていただきます。

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